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  • 发布时间 : 2021-08-06 11:02:50
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  这里介绍一篇发表在Marine Drugs期刊上的文章,题目是《深共晶溶剂-双水相体系高效纯化条斑紫菜R-藻红蛋白》,通讯作者为哈尔滨工业大学(威海)环境科学与工程、海洋科学学院的王全富教授。引用信息为Marine Drugs. 2020 Dec;18(12):618


  其中,圆二色光谱为Bio-Logic公司的MOS-500机型测得,用于检测蛋白样品的二级结构,并对比两种纯化方法的结果差异。


  条斑紫菜中富含R-藻红蛋白(R-PE),是一种海洋生物活性蛋白。本研究采用深共晶溶剂-双水相体系(DES-ATPS)结合硫酸铵沉淀法对R-PE进行了纯化,并采用一定的工艺进行了表征。首先,选择氯化胆碱-尿素(ChCl-U)作为合适的DES形成ATPS用于R-PE的提取。然后进行单因素实验,在最佳条件下(0.040mg R-PE加入0.35g/K2HPO4(0.8g/mL,0.5ml)提取20min),R-PE的纯度(A565/A280)为3.825,收率为69.99%(w/w)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,纯化的R-PE含有三条主带。纯化后,在native-PAGE上出现一条带。紫外-可见光谱在495、540和565nm处有特征吸收峰。在495nm激发时,R-PE的发射波长为570nm。所有光谱结果表明,R-PE的结构在整个过程中保持不变,证明了该方法的有效性。透射电子显微镜(TEM)显示,聚集和周围现象是R-PE萃取的驱动力。本研究为药物开发提供了一种绿色、简便的R-PE纯化方法。

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