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圆二色光谱具有安全便捷的优点

华洋科仪   2017-09-04 06:23:29 文字大小:[][][] 点击次数:53
   圆二色光谱具有安全便捷的优点
   圆二色光谱用于推断非对称分子的构型和构象的一种旋光光谱。光学活性物质对组成平面偏振光的左旋和右旋圆偏振光的吸收系数(ε)是不相等的,εL≠εR,即具有圆二色性。如果以不同波长的平面偏振光的波长λ为横坐标,以吸收系数之差Δε=εL-εR为纵坐标作图,得到的图谱即是圆二色光谱,简称CD。
   如果某手性化合物在紫外可见区域有吸收,就可以得到具有特征的圆二色光谱。由于εL≠εR,透射光不再是平面偏振光,而是椭圆偏振光,摩尔椭圆度[θ]与Δε的关系为:[θ]=3300Δε。圆二色谱也可以摩尔椭圆度为纵坐标,以波长为横坐标作图。由于△ε有正值和负值之分,所以圆二色光谱也有呈峰的正性圆二色谱和呈谷的负性圆二色谱。在紫外可见光区域测定圆二色光谱与旋光谱,其目的是推断有机化合物的构型和构象。
   样品必须保持一定的纯度不含光吸收的杂质,溶剂必须在测定波长没有吸收干扰,样品能完全溶解在溶剂中,形成均一透明的溶液。圆二色光谱缓冲液、溶剂要求与池子选择,缓冲液和溶剂在配制溶液前要做单独的检查,看是否在测定波长范围内有吸收干扰, 看是否形成沉淀和胶状;在蛋白质测量中,经常选择透明性极好的磷酸盐作为缓冲体系。
   样品不同,测定的圆二色光谱范围不同,对池子大小的选择和浓度的要求也不一样。蛋白质CD光谱测量一般在相对较稀的溶液中进行。椭圆率和摩尔椭圆率都依赖于测量条件。因此,温度、波长和样品浓度总是应该特别注明的。当用压片法或石蜡油研磨法进行固体粉末样品测试时,要尽可能地研磨获得细小均匀的样品颗粒。圆二色光谱采用石蜡油糊方法时,必须注意某些憎水有机化合物可能溶于石蜡油中,这时所得圆二色光谱在某种意义上应视为溶液CD光谱。
   圆二色光谱采用压片法测试固体CD时,在保证手性样品的定性浓度达到CD光谱仪检测要求的同时,片越薄越透明越好(但切忌破损)。在某些情况下,压片法不适用于手性抗衡阴离子存在下的固体诱导CD光谱的测定。